1. Используйте онлайн-фильтры
Встроенный фильтр помещается между автоматическим пробоотборником и хроматографической колонкой (или защитной колонкой). Обычные встроенные фильтры делятся на встроенные фильтры из нержавеющей стали со сменной фриттой (0,5 мкм или 0,2 мкм) и одноразовые фильтры из ПЭЭК. Для онлайн-фильтров, изготовленных из различных материалов, как правило, необходимо выбирать ситовую пластину с меньшей апертурой, чем фритта колонки, чтобы эффективно улавливать частицы, которые могут блокировать фритту хроматографической колонки. Как только обнаруживается, что давление в приборе начинает увеличиваться, возможно, фритта встроенного фильтра начинает засоряться, и мы должны обновить ее до того, как она полностью засорится.
Проточные фильтры работают так же, как и мембраны, но не требуют дополнительной работы. После центрифугирования образца все еще возможно попадание небольшого количества частиц в прибор, а остаточные частицы могут быть задержаны встроенным фильтром, расположенным перед хроматографической колонкой. Кроме того, преимущество онлайн-фильтра в том, что его просто и легко заменить. Как правило, его замена занимает всего 5 минут, и его можно перезапустить для использования, и ему не нужно тратить время на перенастройку или калибровку. Еще одним преимуществом является то, что встроенный фильтр также может отфильтровывать частицы, образующиеся в результате старения и износа некоторых частей прибора. Я решительно выступаю за то, чтобы каждый прибор для жидкой фазы был оборудован встроенным фильтром. Даже если используется защитная колонка, я также рекомендую установить встроенный фильтр перед защитной колонкой.
2. Используйте защитную колонку
Защитная колонка представляет собой короткую хроматографическую колонку, установленную перед хроматографической колонкой. Обычно ее длина составляет 1-2 см, а насадка соответствует насадке используемой колонки, а размер пор используемой фритты не превышает размер пор фритты, используемой в колонке. Защитная колонна выполняет две функции: (1) она может блокировать частицы, которые могут блокировать колонну; (2) поскольку защитная колонка и насадка колонки совпадают, любые химические примеси, которые могут необратимо взаимодействовать с насадкой колонки без образования пиков, будут улавливаться в первую очередь защитной колонкой.
Использование защитной колонки определенно может продлить срок службы колонки. Однако, прежде чем решить, использовать ли защитную колонку, рекомендуется оценить следующие моменты:
(1) Защитная колонна стоит недешево, поэтому подумайте, можно ли компенсировать затраты на покупку защитной колонны за счет увеличения срока службы колонны;
(2) Как долго длится жизнь охранной колонны? Необходимо обратить внимание на то, когда необходимо заменить защитный картридж, чтобы не загрязнить хроматографическую колонку из-за слишком поздней замены;
(3) Как промыть защитную колонку? При промывке защитную колонку и хроматографическую колонку необходимо промывать отдельно, чтобы избежать смывания примесей, накопленных в защитной колонке, в хроматографическую колонку;
(4) Не ожидайте повышения эффективности колонки за счет добавления защитной колонки 1-2 см. Хотя установка защитной колонки аналогична увеличению длины колонки, использование защитной стойки также добавляет два соединителя и соединительные трубы, что снизит эффективность колонки инструментальной системы, поэтому было бы хорошо, если бы эффективность колонки без защитной колонка может быть сохранена.
Излишне говорить, что использование защитных колонок, безусловно, может продлить срок службы колонок, но рекомендуется, чтобы каждая лаборатория оценивала потребность в защитных колонках с точки зрения экономики и усилий. Даже с защитной колонкой я бы рекомендовал поставить встроенный фильтр между защитной колонкой и автодозатором, ведь замена встроенного фильтра дешевле замены защитной колонки и увеличивает срок службы как защитной колонки, так и колонки. .
3. Не вводите необработанные образцы
С предварительной обработкой или без нее рекомендуется фильтровать или центрифугировать все образцы перед инъекцией. Например, когда образец фильтруют через фильтрующую мембрану для удаления частиц и тем самым уменьшения засорения фритты хроматографической колонки, размер пор фильтрующей мембраны должен быть меньше размера пор фритты хроматографической колонки. Как правило, в хроматографических колонках с частицами размером более 3 мкм используется фритта размером 2 мкм, в хроматографических колонках с частицами размером 3 мкм используется фритта 0,5 мкм, а в колонках с частицами менее 3 мкм обычно используется 0,2 мкм. фритта, поэтому обычные фильтры 0.45 мкм можно использовать практически во всех хроматографических колонках, за исключением частиц менее -2 мкм; для колонок с частицами менее -2 мкм обычно используются фильтры с порами 0.2 мкм. Большинство фильтровальных мембран предварительно упакованы и могут быть непосредственно присоединены к шприцу для фильтрации или использованы в качестве фильтрующего планшета в 96-луночном планшете.